咱们常常碰到，说某某减肥胶囊中含有左旋肉碱百分之多少，这个含量怎样去测量呢?科学上测量左旋肉碱含量的方式有很多，这里借助专业文献，介绍一种反相高效液相色谱测定保健品中左旋肉碱含量的方式。

　　摘　要　树立了反相高效液相色谱测定保健品中左旋肉碱含量的方式。采取Nucleosil C18(250mm×4。6mm，5 m)色谱柱，以甲醇-0。05mol?mL-1磷酸二氢钾(用80%磷酸调pH为2。5)(8∶92)为活动相，流速为0。6mL÷min，用紫外检测器在210nm波优点检测。规范品及样品均采取0。5mmol÷L盐酸溶解，且样品要在30℃下超声提取30min。后果标明，左旋肉碱有良好线性关系(r2=0。9997)，样品的分别水平较好，绝对规范偏向(RSD)为1。54%，加标回收率为100。08%—117。89%。该方式较为简便，疾速，有良好的正确度。可用于肉碱类保健品中左旋肉碱含量的测定。

　　1、　　引言

　　左旋肉碱(L-Carnitine)亦称Vitamin BT，是一种绝对分子量小的类蛋白质分子，普遍存在于人体的各组织中， 尤以心肌及骨骼肌中含量最高，大局部机体所需的肉碱成分起源于饮食中的肉类和奶制品。其重要功用是匆匆进脂类代谢，将长链脂酰基带入线粒体基质，同时将线粒体内发生的短链脂酰基输入，调理线粒体内外酰基CoA÷CoA(辅酶A)的比率【1】。左旋肉碱缺少将搅扰脂肪酸的代谢而招致能量分解缺少，涌现易疲惫，肌肉无力，心慌等症状，重大者涌现代谢杂乱，苏醒甚至逝世亡。随着人们对左旋肉碱养分价值的关注及认可，它已经被越来越多的用于减肥食品，婴幼儿食品，饮料，养分填补剂，临床等方面【2】。目前肉碱的检测方式有规范溶液滴定法【3】，酶技巧测定法【4】，高效液相色谱法【5】等。规范溶液滴定法较为毛糙，难以得到肉碱的正确含量;酶技巧测定法重要用于血浆中; 鉴于保健品中肉碱大多是左旋肉碱，方式能够简化，本试验采取反相高效液相色谱法测定了泡腾片中左旋肉碱的含量，填补了该剂型保健品中左旋肉碱含量测定的空白，可用于肉碱类保健品中左旋肉碱含量的测定。

　　2、试验局部

　　2。1　　仪器与试剂

　　SUMM IT高效液相色谱仪(美国戴安公司)，UVD170V紫外检测器，Nucleosil-C18色谱柱(250mm×4。6mm，5 m)，变色龙(Chromeleon)色谱任务站;KQ-500B型超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司);pHS-2C型试验室pH计(上海宇隆仪器有限公司);BS 110S型电子天平(德国Sart orius公司)。甲醇(色谱纯);磷酸二氢钾、庚烷磺酸钠和盐酸均为剖析纯;左旋肉碱规范品(德国Dr。Ehrenstorfer公司)。试验用水为超纯水。

　　2。2　　色谱条件

　　色谱柱：Nucleosil C18(250mm×4。6mm，5 m)色谱柱;活动相：甲醇-0。05mol÷mL磷酸二氢钾缓冲溶液(pH=2。5)(体积比8∶92);流速：0。6mL÷min;检测波长：210nm;柱温：20℃;进样量：20 L。

　　2。3　　缓冲溶液的配制

　　称取6。8045g磷酸二氢钾及0。4045g庚烷磺酸钠，溶于500mL水中，用磷酸调pH为2。5。装于棕色试剂瓶中，备用。试验标明，缓冲溶液中参加庚烷磺酸钠能使左旋肉碱更加稳固，使测定的后果更加正确。

　　2。4　　规范溶液的配制

　　正确称取50。0mg左旋肉碱规范品，用0。5mmol÷L盐酸溶解并定容至25mL，配制成2000 g÷mL的规范储藏液。

　　2。5　　样品解决

　　取肉碱泡腾片两片(3。5951g)溶于100mL水中，30℃超声提取30min，取5mL置于25mL容量瓶中，用0。5mmol÷mL盐酸定容至刻度，同样方式配制平行样3份，分手记为样品1、2、3。用孔径为0。45 m的滤头过滤后，置于小离心管中，作为待测液。

　　3、后果与探讨

　　3。1　色谱条件的挑选

　　3。1。1　　缓冲溶液的pH值

　　在反相高效液相色谱剖析中，pH值对所剖析化合物的保存时光，峰形都会发生较大的影响。试验中随着pH的增添，保存时光延伸。尝试了不同pH值(2。3、2。5、2。9)的缓冲溶液，综合斟酌色谱柱，保存时光，分别后果等多方面因素最终抉择pH 2。5的缓冲溶液。

　　3。1。2　　活动相的抉择

　　因为左旋肉碱在210nm时有最大排汇，而甲醇在此波长下会涌现显著的溶剂峰，所以试验初期，曾尝试用乙腈作为活动相，但试验后果标明，用乙腈作为活动相时的峰形不幻想，而甲醇作为活动相时的峰形及保存时光都较为幻想，所以最终疏忽了甲醇的溶剂峰，抉择了甲醇作为活动相。考核了甲醇比例为15%、10%、8%、5%时的状况，发明保存时光随甲醇比例的增大而减小，甲醇比例较低时候别后果较好，综合斟酌最终抉择了甲醇比例为8%。

　　3。1。3　　流速和柱温的抉择

　　试验中尝试不同的流速1。0、0。8、0。6mL÷min，只要在0。6mL÷min时样品的分别水平较为幻想;考核柱温为30、25、20℃，在20℃时样品的分别后果最好。故抉择流速为0。6mL÷min，柱温为20℃。

　　3。2　　校准曲线

　　分手取1。0，2。0，4。0，6。0，8。0mL左旋肉碱规范储藏液置于10mL容量瓶中，用0。5mmol÷L盐酸定容，配成200，400，800，1200，1600 g?mL-1的左旋肉碱规范溶液。经0。45 m滤膜过滤后，按色谱条件进样20 L测定，以峰面积y(mAU?min)为纵坐标，肉碱浓度x(g÷mL)为横坐标绘制744光谱试验室第28卷校准曲线。后果标明左旋肉碱在200—1600 g÷mL规模内有良好线性关系，线性回归方程为y=0。0068x-0。0539，r2=0。9997。规范品色谱图见图1。

　　3。3　　样品的测定

　　取待测液遵照2。2中色谱条件分手进样，每个样品平前进样两次，后果取均匀值，盘算出样品中左旋肉碱含量0。2211g÷g。样品的HPLC谱图见图2。样品的绝对规范偏向(RSD)为0。70%。

　　3。4　　精细度试验

　　选取1200 g?mL-1的左旋肉碱规范溶液进行精细度试验，遵照2。2中色谱条件延续进样5次，绝对规范偏向(RSD)为1。54%。

　　3。5　　加标回收试验

　　为了考核方式的牢靠性，对试验后果进行了加标回收率试验，后果见表1。本方式的回收率在100。08%—117。89%之间。

　　3。6　　稳固性试验

　　取同一批样品，室温搁置2、6、12、16、18h，按2。2色谱条件进行测定，肉碱浓度基础稳固。

　　4、　　论断

　　本方式简朴，易于控制，反复性和再现性都对比好。可用于肉碱类保健品中左旋肉碱含量的测定和产品德量控制。

　　参考文献

　　【1】 Selinek K G，Johein h H。T he Determinat ion of L-Carnitine in Several Food S amples【J】。F ood Chem。，2007，105(2)：793—804。

　　【2】 周书凤。左旋肉碱—一种人体特定条件下的必须养分素【J】。国外医学卫生学分册，1996，23(1)：33—35。

　　【3】 中华国民共和国国度规范。食品增添剂左旋肉碱【S】。G B÷T 17787-1999。北京：国度质检总局、国度规范委，1999。7—12。

　　【4】 贺稚非，王勇德。新型养分剂L-肉碱的检测钻研【J】。肉类工业，2000，7：32—34。

　　【5】 伟霞，杨冀州，刘亚风等。保健品中左旋肉碱的反相高效液相色谱法测定【J】。剖析测试学报，2008，27(10)：1124—1127。

转载请注明来自康比特左旋肉碱  左旋肉碱的减肥效果,左旋肉碱哪个牌子好,康比特左旋肉碱有用吗,康比特左旋肉碱价格,康比特左旋肉碱胶囊

本文标题：反相高效液相色谱法测定保健品中左旋肉碱的含量

地址：http://zuoxuan.ylushop.com/Article/376.html

【已有0位网友发表了看法,你呢？】